Dobbelt-strenget DNA supplement af et mRNA sekvens; syntetiseret in vitro fra et modent RNA skabelon ved hjælp af reverse transkriptase (til at oprette en enkelt streng af DNA fra RNA skabelon) og DNA-polymerase (til at oprette den dobbelt-strenget DNA). Forberedelse af cDNAs er ofte det første skridt i kloning DNA sekvenser af interesse. Bruges så konkret og følsomme sonder i hybridisering undersøgelser, fordi cDNAs normalt ikke omfatter lovgivningsmæssige eller andre kontrollerende sekvenser, og så de kan bruges til at identificere (sonde) og isolere gener og deres tilknyttede sekvenser fra genomisk DNA.