Singel-luhtunud nukleotiidijärjestuse jättis piirang fragment tüüp II piiramine ensüümidega, mis lõigatakse iga tegevussuuna eraldi kohas. Ühesuunaline regioonides on hübridisatsioon täiendavad poolile teiste killud rekombinantse DNA loomise ajal. aka väljaulatuv ots; ülendi; sidus end.