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Séquençage de l'ADN

Procédures de détermination de la séquence nucléotidique d'un fragment d'ADN. Il y a deux méthodes courantes pour ce faire: •

la technique de Maxam et Gilbert (dégradation chimique), qui utilise différents produits chimiques afin de briser l'ADN en fragments à des bases spécifiques ; ou

• la technique de Sanger (appelée la méthode de chaîne ou de di-déoxy) utilise pour faire de nouvelles chaînes d'ADN, avec di-désoxy nucléotides (terminateurs de chaîne) pour arrêter la chaîne au hasard comme il pousse l'ADN polymérase.

Dans les deux cas, les fragments d'ADN sont séparés selon la longueur par électrophorèse sur gel de polyacrylamide, permettant la séquence à lire directement à partir du gel.

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Penulis

  • J Laurent
  • (Lyon, France)

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