Melengkapi DNA beruntai ganda urutan mRNA; disintesis in vitro dari template RNA dewasa menggunakan transkriptase (untuk membuat tunggal untai DNA dari RNA template) dan DNA polimerase (untuk menciptakan DNA beruntai ganda). Persiapan cDNAs sering adalah langkah pertama dalam kloning urutan DNA yang menarik. Digunakan sebagai tertentu dan sensitif probe dalam hibridisasi studi, karena cDNAs biasanya tidak termasuk peraturan atau mengontrol urutan, dan sehingga mereka dapat digunakan untuk mengidentifikasi (probe) dan mengisolasi gen dan urutan mereka terkait dari genom DNA.