Een methode voor het lange rangschikken (> 1 kb) stukken DNA gekloond. De oorspronkelijke volgorde reactie onthult de volgorde van de eerste paar honderd nucleotiden van het gekloonde DNA. Op basis van deze gegevens een primer over 20 nucleotiden met en complementair aan een reeks in de buurt van het einde van gesequenceerd DNA is gesynthetiseerd, en wordt vervolgens gebruikt voor de volgende paar honderd nucleotiden van het gekloonde DNA sequencing. Deze procedure wordt herhaald totdat de volledige nucleotide sequentie van het gekloonde DNA wordt bepaald.