Một phương pháp để xác định trình tự dài (> 1 kb) nhân bản những mảnh ADN. Ban đầu xác định trình tự phản ứng cho thấy thứ tự của các nucleotide đầu tiên vài trăm DNA nhân bản. Trên cơ sở những dữ liệu này, một mồi chứa về 20 nucleotide và bổ sung cho một chuỗi gần kết thúc nói DNA được tổng hợp, và sau đó được sử dụng để xác định trình tự các nucleotide tới vài trăm DNA nhân bản. Quy trình này được lặp đi lặp lại cho đến khi dãy nucleotide đầy đủ của DNA nhân bản được xác định.